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飯田様 LIFEの皆様
飯田さん:
>それに精製の程度によって,単位活性あたりの重さが変わりますよね.
とりあえず活性とかKm, Kcatをはかっているサンプルは純品であるという前提
になっているのですが・・・。(^^;)
飯田:
>Km や Kcat は,インヒビターとかなければ,精製の程度に
>影響されにくそうですね.(どうだっけな.)
>それで,ではないでしょうか.
という事情で、精製の程度は関係ないでしょう。精製されてない酵素では、普
通はKm, Kcatは測りません。最低限SDS-PAGEで1バンドであるという確認をし
たものについてのみ酵素の性質を調べるという段階に入れます。
それにKcat=Vm/[E]で計算するはずだから、純品でなければ[E]が測れないです。
おそらくは測定している基質の濃度がKmの前後になっていたりした場合に、比
活性の値が少しずつ誤差を生じるからではないかと思います。
でもKm, Kcatといえども、完全に信用してもいいのはオーダーだけで、かなり
厳密に取ったデータの場合で有効数字1桁くらいだと思いますよ。
2度以上測定してみて2桁一致するというのは、かなり難しいでしょう。
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MAEDA Miki
(- -) mmaeda@***.***
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